Clonagem e purificação de fragmento da proteína capsidial de Banana streak OL virus

Pesquisa Agropecuária Brasileira

Ricardo Lombardi¹  Ricardo Harakava¹  Addolorata Colariccio¹ 

[1] ,Instituto BiológicoSão Paulo SP

关键词: Badnavirus;    Escherichia coli;    Musa;    antissoro;    bananeira;    expressão de proteínas recombinantes;    Badnavirus;    Escherichia coli;    Musa;    antisera;    banana plant;    recombinant protein expression;   

DOI  :  10.1590/S0100-204X2010000800006

来源: SciELO

【 摘 要 】

O objetivo deste trabalho foi clonar e induzir a expressão de fragmento da proteína capsidial de Banana streak OL virus (BSOLV-CP) em Escherichia coli, bem como purificar a proteína recombinante obtida. Empregou-se um par de iniciadores específicos para amplificar, em PCR, um fragmento de aproximadamente 390 pb, da região codificadora da porção central da BSOLV-CP. O fragmento obtido foi clonado em vetor pGEM-T Easy, subclonado em vetor pQE-30 e transformado em células de E. coli M15 (pREP4) por choque térmico. A expressão da proteína foi induzida por tiogalactopiranosídeo de isopropila (IPTG), e a proteína recombinante BSOLV-rcCP de 14 kDa foi detectada em Western blot e Dot blot. A expressão da proteína BSOLV-rcCP abre novas possibilidades para a obtenção de antígenos para a produção de antissoros contra o BSOLV.

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