Teste de ELISA indireto para diagnóstico sorológico de leishmaniose visceral em canídeos silvestres

Pesquisa Veterinária Brasileira

Paulo R.b. Ferreira²  Daniela F. Larangeira²  Lídia S. De Oliveira²  Marcelo De C.c. Malta¹  Marta C. Gomes¹  Bruno L. Bastos¹  Ricardo W. Portela¹  Stella Maria Barrouin-melo¹ 

[1] ,Universidade Federal da Bahia Escola de Medicina Veterinária e Zootecnia Laboratório de Infectologia VeterináriaSalvador BA ,Brasil

关键词: Canídeos silvestres;    Leishmania;    leishmaniose visceral;    ELISA;    Proteína A;    Wild canids;    Leishmania;    visceral leishmaniasis;    ELISA;    protein A;   

DOI  :  10.1590/S0100-736X2013000400018

来源: SciELO

【 摘 要 】

Na América do Sul, alguns canídeos silvestres são considerados reservatórios naturais da Leishmania chagasi. A resposta imunológica desses animais à Leishmania é pouco conhecida, havendo a necessidade de métodos diagnósticos adequados para esse fim. No presente estudo, é descrita a padronização do ensaio imunoenzimático indireto (ELISA) para o diagnóstico sorológico de leishmaniose visceral em canídeos silvestres brasileiros. Foram estudadas amostras de soro e plasma de 12 canídeos cativos: sete lobos-guará (Chrysocyon brachyurus), três raposinhas (Lycalopex vetulus) e dois cachorros-do-mato (Cerdocyon thous). As amostras de um C. brachyurus e uma L. vetulus, cativos em área endêmica para LV, que apresentavam doença clínica e positividade em testes de Imunofluorescência Indireta e Reação em Cadeia de Polimerase, foram utilizadas como controles positivos. Foram comparados os conjugados anti-IgG de cão e proteína A, ambos ligados a peroxidase, cujos testes detectaram quatro (04/12) e três (03/12) C. brachyurus soropositivos para anticorpos anti-Leishmania sp., respectivamente. As médias das densidades ópticas (DOs) das amostras negativas foram nitidamente mais baixas do que as médias das DOs dos positivos tanto no ELISA com anti-IgG de cão (4,8 vezes) como com proteína A (15,5 vezes). Os soros de três C. brachyurus positivos no ELISA indireto foram avaliados por Western blotting e identificaram 22 bandas, sendo imunodominantes as de peso molecular de 19, 22, 24, 45 e 66 kDa. Os testes ELISA com a proteína A e o conjugado anti-IgG de cão apresentaram respectivamente concordância excelente (Kappa = 1; p<0,001) e moderada (Kappa = 0,8; p<0,0015), com o Western blotting. Ambos foram, portanto, considerados adequados a avaliações de triagem de animais cuja resposta humoral de anticorpos indica contato com o parasito, úteis para subsidiar estudos para adequação de metodologias específicas para os canídeos silvestres.

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