Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical | |
Diferenciação de micobactérias por PCR multiplex | |
Diogo Da Rocha Poroca2  Andrea Santos Lima2  Juliana Falcão De Araújo Lima2  Heidi Lacerda Alves Da Cruz2  Rosana De Albuquerque Montenegro2  Fábio Lopes De Melo1  Haiana Charifker Schindler2  Lílian Maria Lapa Montenegro2  | |
[1] ,Fundação Oswaldo Cruz Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães Departamento de ImunologiaRecife PE | |
关键词: Micobactérias; PCR multiplex; IS6110; dnaJ; hsp65; Mycobacteria; Multiplex PCR; IS6110; dnaJ; hsp65; | |
DOI : 10.1590/S0037-86822009000600020 | |
来源: SciELO | |
【 摘 要 】
O trabalho visou à otimização de um método baseado na reação em cadeia da polimerase multiplex - para diferenciação de micobactérias de interesse para a saúde pública. A PCR Multiplex baseou-se na amplificação simultânea do genehsp65, presente em todo gênero Mycobacterium, do gene dnaJ, presente apenas em Mycobacterium tuberculosis e Mycobacterium avium e da sequência de inserção IS6110 presente no complexo Mycobacterium tuberculosis, gerando amplicons de 165pb, 365pb e 541pb, respectivamente. O limite de detecção foi de 1fg para o alvo hsp65, 100pg para o dnaJ e 0,1fg para o IS6110. A PCR multiplex detectou até 100pg de DNA de Mycobacterium tuberculosis. O sistema demonstrou ser específico e sensível na detecção de Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium bovis, Mycobacterium avium e Mycobacterium smegmatis. Os resultados obtidos utilizando cepas de referência demonstraram que a PCR multiplex pode ser uma ferramenta rápida, sensível e específica na diferenciação de micobactérias.
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