High correlation in dengue antibodies and antigen detection using serum or plasma samples

Revista de la Facultad de Medicina

Velandia-Romero, Myriam L¹  Castilla, María G¹  Castellanos, Jaime E¹  Coronel-Ruiz, Carolina¹  Parra-Álvarez, Shirly¹ 

[1] Universidad El Bosque, Bogotá, Colombia

关键词: Dengue;    Serum;    Plasma;    ELISA;    Diagnostic;   

DOI  :  10.15446/revfacmed.v63.n4.50419

学科分类：医学（综合）

来源: Universidad Nacional de Colombia * Facultad de Medicina

【 摘 要 】

Introducción. El diagnóstico adecuado de dengue por laboratorio es importante para la atención, así como para el control de brotes y epidemias. Hasta el momento, las pruebas ELISA para diagnóstico serológico de la infección se encuentran validadas en muestras de suero; sin embargo, en algunas ocasiones la cantidad o calidad de la muestra es inadecuada, o solo se tiene acceso a sangre anticoagulada tomada para el análisis de los parámetros hematológicos en el hemograma. Objetivo. Evaluar el desempeño de cuatro pruebas ELISA en muestras de suero y plasma de casos sospechosos de dengue. Materiales y métodos. Se procesaron 42 muestras —21 de suero y 21 de plasma— por las técnicas de ELISA de captura para IgM, ELISA de captura para IgG, ELISA indirecta para IgG y ELISA para la detección del antígeno viral NS1. Resultados. El porcentaje de muestras positivas encontrado fue IgM 33.3%, IgG Captura 33.3%, IgG Indirecta 90.5%, NS1 23.8%. El 42.9% de las muestras fueron positivas por RT-PCR (n=9). Todas las pruebas se comportaron igual tanto en sueros como plasmas (coeficiente Kappa 1.0). Conclusión. Los resultados obtenidos muestran una alta concordancia entre las mediciones realizadas en suero y en plasma, lo cual sugiere que la muestra de plasma puede utilizarse para el diagnóstico y la confirmación de los casos de dengue. Palabras clave: Dengue; Suero; Plasma; Diagnóstico; Pruebas serológicas. (DeCS).Parra-Álvarez S, Coronel-Ruiz C, Castilla MG, Velandia-Romero ML, Castellanos JE. Alta correlación en la detección de anticuerpos y antígenos de virus del dengue en muestras de suero y plasma. Rev. Fac. Med. 2015;63(4):687-93. Spanish. doi: http://dx.doi.org/10.15446/revfacmed.v63.n4.50419.Summary Introduction. Appropriate dengue laboratory diagnosis is an important tool to manage the disease, as well to control possible outbreaks. Currently, ELISA dengue serological tests are validated to use with serum, however sometimes samples quality or quantity is inappropriate or there is only availability of anti-coagulated blood samples which have been used in total blood tests —haemogram—. Objective. To assess the performance of four dengue ELISA tests in serum or plasma samples obtained from presumptive dengue cases. Methodology. Forty two samples, 21 of serum and plasma each, were processed to dengue Capture IgM ultramicro-ELISA, Capture IgG ELISA, Indirect IgG ELISA and NS1 antigen ELISA. Nine out of 21 patients were diagnosed as dengue cases following the diagnostic algorithm. Results. The percentage of positive samples found was Capture IgM 33.3%, Capture IgG 33.3%, Indirect IgG 90.5% and NS1 dengue antigen 23.8%. Comparing the results between all ELISA tests it can be said that they had similar performances both in serum and plasma, the Kappa coefficient obtained was 1.0. Conclusions. These results show a high concordance between the measurements carried out in serum and plasma, which leads to suggest the latter may be used as a tool in the diagnosis and confirmation of dengue cases. Keywords: Dengue; Serum; Plasma; ELISA; Diagnostic. (MeSH).Parra-Álvarez S, Coronel-Ruiz C, Castilla MG, Velandia-Romero ML, Castellanos JE. [High correlation in dengue antibodies and antigen detection using serum or plasma samples]. Rev. Fac. Med. 2015;63(4):687-93. Spanish. doi: http://dx.doi.org/10.15446/revfacmed.v63.n4.50419.Introducción La infección por dengue es causada por cualquiera de los cuatro serotipos del virus del dengue DENV (DENV-1 al DENV-4), que hacen parte del género Flavivirus y la familia Flaviviridae. La enfermedad se encuentra ampliamente distribuida en más de 100 países tropicales y subtropicales de los cinco continentes, es transmitida por los mosquitos Aedes aegypti y Aedes Albopictus y representa un problema de salud pública a nivel mundial por el aumento en la incidencia, la severidad de los casos y el incremento en frecuencia de las epidemias (1-4). En Colombia, la incidencia de dengue sigue creciendo debido a la presencia del vector Aedes aegypti en 90% del territorio nacional, la introducción de Aedes albopictus y la circulación simultánea de los cuatro serotipos. Alrededor de 620 municipios de nuestro país, ubicados por debajo de 1800 m s. n. m., poseen condiciones adecuadas de temperatura, humedad relativa y pluviosidad que favorecen la presencia del vector (5,6). En el año 2013 se presentaron en el país 125554 casos de dengue, de los cuales solo se confirmaron por laboratorio 64407 (51.3%) (8); del mismo modo, en el año 2014, a la semana epidemiológica 53, se notificaron 110473 casos, de los cuales solo se confirmó el 43.4% (9). Para el diagnóstico de dengue es importante conocer las variaciones en los parámetros de laboratorio que pueden orientar al médico sobre la fase de la enfermedad en la que se encuentra el paciente y sobre la identificación oportuna de los signos de alarma con el propósito de realizar el diagnóstico oportuno, el manejo adecuado de los casos y el tratamiento y vigilancia de la enfermedad (1,9,10). Además, para la confirmación de los casos por laboratorio se recomiendan pruebas de diagnóstico serológico y virológico en muestras de suero pareadas —es decir tomadas en la fase febril y en la fase de recuperación— con el propósito de detectar tempranamente los casos severos, realizar el diagnóstico diferencial con otras etiologías y programar el desarrollo de actividades de vigilancia de la enfermedad y del control del vector (11,12,13). En nuestro país, el protocolo para la confirmación de los casos por el laboratorio se basa fundamentalmente en la detección en suero de anticuerpos IgM específicos para dengue en una muestra tomada al paciente después del quinto día de inicio de los síntomas. La toma de una muestra de sangre adicional para obtener el suero y confirmar el diagnóstico de dengue genera rechazo, especialmente en pacientes pediátricos y sus padres; sin embargo, la mayoría de instituciones de salud toman muestras de sangre anticoagulada (EDTA) para el monitoreo de las variables hematológicas en el hemograma; por ello, el uso de plasma en las pruebas diagnósticas permite el diagnóstico y seguimiento de la infección por dengue, mejorando de este modo la cobertura y oportunidad de diagnóstico, lo cual es importante tanto para la atención de los pacientes como para la vigilancia epidemiológica (14). Por lo tanto, el propósito del presente trabajo fue evaluar el desempeño de las pruebas de diagnóstico serológico de dengue para la detección de anticuerpos IgM e IgG —por la técnica de captura y por la técnica indirecta— y de la proteína NS1 en muestras de suero y plasma de casos sospechosos de dengue. Materiales y mé

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