지실 열수추출물의 구성 성분에 의한 위장관 운동 촉진 효과의 기전 연구

Poncirus Fructus;naringin;naringenin;prokinetics;ghrelin receptor;5-HT4 receptor

약학대학 제약학과 ;

University:서울대학교 대학원

关键词: Poncirus Fructus;    naringin;    naringenin;    prokinetics;    ghrelin receptor;    5-HT4 receptor;   

Others  :  http://s-space.snu.ac.kr/bitstream/10371/133425/1/000000004409.pdf

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来源: Seoul National University Open Repository

【 摘 要 】

Poncirus trifoliate (L.) Raf. (Rutaceae), 일명 Poncirus fructus(PF)로 명명된 지실은 탱자의 미성숙과실로써, 소화 불량이나 건위를 목적으로 사용되어온 생약으로, 위장관 운동 촉진 효과 (prokinetic effect)를 갖는 것으로 알려져 있으며. 5-Hydroxytryptamine4 Receptor (5-HT4R)를 활성화 시켜서 이러한 위장관 촉진 효과가 나타나는 것이 잘 알려져 있다. 그러나, 대표적인 5-HT4R 효능제인 cisapride와 비교했을 때 5-HT4R 의 활성 정도는 다소 약한 것으로 나타나, 5-HT4R 이외의 다른 기전의 관여 가능성이 제시되었다. 실제로 동 실험실의 후속 연구에서 지실 열수추출물 (PF-W)이 모틸린 수용체 (motilin receptor, MTLR)가 아닌 그렐린 수용체 (ghrelin receptor, GHLR)를 활성화 시킨다는 사실을 새롭게 밝혀낸 바 있다. 하지만, PF-W에 포함된 어떤 단일 물질이 이러한 기능을 유발하는 지에 대해서는 아직까지 알려져 있지 않다. 따라서 이번 연구에서는 다양한 지실 추출물 구성성분 중 어떤 단일 물질이 위장관 운동 촉진 효과 기전을 나타내는지를 밝히는 것을 목표로 하였다.먼저 지실의 단일구성성분의 GHLR의 활성화 여부를 확인하였다. G-protein coupled receptor (GPCR)인 GHLR은 활성화되면 세포 내 칼슘 농도가 증가한다. HEK-293T 세포주에 GHLR을 과발현시킨 후 PF-W의 단일 구성 물질로 잘 알려져 있는 12개의 물질들을 처리한 다음 칼슘 이미징 방법을 이용하여 세포 내 칼슘 농도 변화를 관찰하였다. 측정 결과 12개의 주요 구성 성분 중 naringin과 naringenin이 GHLR을 활성화 시키는 단일 구성 성분임을 알 수가 있었으며, 동일한 농도에서는 naringin이 활성이 더 활발한 것을 확인하였다. 또한 5-HT4R 활성화 여부도 더불어 확인하였다. 5-HT4R 가 활성화 될 시에는 세포 내에 cAMP 농도가 증가하게 되며, 효소결합 면역흡착 분석법 (Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)을 통해 측정이 가능하다. 측정 결과 PF-W 처리 시에는 cAMP 증가를 확인하였으나, 실험에 사용한 단일 구성 성분들은 cAMP를 변화시키지 못하였다.본 연구를 통해 지실을 구성하고 있는 성분 중 naringin과naringenin이 위장관 운동을 촉진시킨다고 알려진 GHLR를 활성화시킴으로써 위장관 촉진 효과를 나타낸다는 것을 알 수 있었으며. 5-HT4R를 활성화 시키는 단일 물질은 찾지 못하였다.