Condiciones para el análisis de proteínas del micelio de Lentinula edodes obtenido por fermentación en estado líquido

Revista Colombiana de Química

Harold Dubán Ardila Barrantes¹  Carolina Chegwin Angarita²  Carolina Vega Oliveros² 

[1] Universidad Nacional de Colombia - Sede Bogotá - Facultad de Ciencias - Departamento de Química - Grupo de Investigación de Actividades Metabólicas Vegetales;Universidad Nacional de Colombia - Sede Bogotá - Facultad de Ciencias - Departamento de Química - Grupo de Investigación de Química de Hongos Macromicetos;

关键词: ácido tricloroacético;    fenol;    electroforesis;    macromicetos;    shiitake;   

DOI  :  10.15446/rev.colomb.quim.v48n3.74843

来源: DOAJ

【 摘 要 】

Pocos son los trabajos enfocados en la producción biotecnológica y el desarrollo de herramientas analíticas en torno a la Lentinula edodes, seta comestible con potencial para el desarrollo de nutracéuticos. Por esto, en esta investigación, se estudió la producción de biomasa del hongo en el tiempo, mediante fermentación en estado líquido, y se seleccionaron las condiciones que permitieron la obtención de extractos para la aplicación de herramientas para análisis proteómico. Los métodos de extracción de proteínas, ácido tricloroacético (TCA) - acetona y TCA – acetona - fenol, fueron comparados en términos del rendimiento de extracción y los perfiles de separación usando electroforesis en 1D (SDS-PAGE) y 2D (IEF-SDS PAGE). Se determinó que a los 10 días de crecimiento se obtiene la mayor producción de biomasa y proteína total. La extracción con TCA - acetona - fenol presentó un mayor rendimiento, resolución y número de bandas en la electroforesis 1D. En 2DE, los dos métodos permitieron la extracción de proteínas con puntos isoeléctricos en el rango de pH 3-10, pero el método TCA - acetona - fenol conllevó a una extracción diferencial, favoreciendo el rango de masa de 33 a 113 kDa. Estos resultados se constituyen en una primera aplicación de técnicas de separación electroforética para futuros estudios proteómicos.

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