Clonagem e expressão da glicoproteína transmembrana do retrovírus HTLV-1 em células de mamíferos

Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical

Flora Cristina Lobo Penteado²  Luciene Medeiros²  Maristela Delgado Orellana²  Patricia Palma²  Aparecida Maria Fontes²  Osvaldo Massaiti Takayanagui¹  Dimas Tadeu Covas¹ 

[1] ,Universidade de São Paulo Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto Hospital das ClinicasRibeirão Preto SP ,Brasil

关键词: Glicoproteína transmembrana;    HTLV-1;    Clonagem;    Expressão de proteínas;    Transmembrane glycoprotein;    HTLV-1;    Cloning;    Protein expression;   

DOI  :  10.1590/S0037-86822006000200007

来源: SciELO

【 摘 要 】

O retrovírus linfotrópico de células T humanas tipo 1 é o agente etiológico da leucemia das células T do adulto e da paraparesia espástica tropical/mielopatia associada ao HTLV-1. O genoma proviral é composto por 9.032 pares de bases, contendo genes estruturais e regulatórios. A glicoproteína transmembrana gp 21 é codificada pelo gene estrutural env. O desenvolvimento de metodologias para a expressão heteróloga de proteínas, assim como a obtenção de uma linhagem celular que expresse a gp 21 recombinante constitutivamente são os principais objetivos do trabalho. O fragmento codificante da gp 21 foi amplificado por Nested-PCR e clonado no vetor pCR2.1-TOPO. Posteriormente, foi realizada a subclonagem no vetor de expressão pcDNA3.1+. A transfecção da linhagem celular de mamíferos HEK 293 foi realizada de maneira transitória e permanente. A produção da gp 21 recombinante foi confirmada por citometria de fluxo e a linhagem celular produtora será utilizada em ensaios de imunogenicidade.

【 授权许可】

CC BY   
 All the contents of this journal, except where otherwise noted, is licensed under a Creative Commons Attribution License