Padronização da titulação da toxina épsilon de Clostridium perfringens tipo D em linhagem contínua de células como alternativa ao bioensaio animal

Ciência Rural

Milton Formiga Souza Júnior²  Zélia Inês Portela Lobato¹  Prhiscylla Sadanã Pires²  Rodrigo Otávio Silveira Silva²  Felipe Masiero Salvarani²  Ronnie Antunes De Assis¹  Francisco Carlos Faria Lobato² 

[1] ,Universidade Federal de Minas Gerais Escola de Veterinária Laboratório de Bacteriose e PesquisaBelo Horizonte MG ,Brasil

关键词: enterotoxemia;    bioética;    soroneutralização;    MDCK;    enterotoxemias;    bioethics;    soroneutralization;    MDCK;   

DOI  :  10.1590/S0103-84782010005000024

来源: SciELO

【 摘 要 】

Enterotoxemia, também chamada de doença do rim pulposo, doença que acomete os ruminantes domésticos, é causada pela ação da toxina épsilon produzida pelo Clostridium perfringens tipo D, um anaeróbio comumente isolado do solo e das fezes de animais sadios. O método tradicional de diagnóstico baseia-se na detecção e classificação dessa exotoxina no conteúdo intestinal por meio da soroneutralização em camundongos. Com isso, o objetivo deste estudo foi padronizar um teste para detecção e titulação dessa toxina in vitro e compará-lo ao fenômeno in vivo. Para isso, uma partida de toxina épsilon de Clostridium perfringens tipo D foi titulada em camundongos e em várias linhagens contínuas de células. Após a determinação da linhagem celular mais sensível, realizaram-se ensaios de titulação in vitro de diluições de uma partida de toxina, comparando-os com os títulos in vivo conhecidos. Os resultados foram agrupados, e foi desenvolvida a equação matemática que melhor adaptou-se aos intervalos trabalhados. A linhagem MDCK, além de mais sensível, demonstrou que o fenômeno observado in vitro pode ser expresso por meio da equação matemática que apresenta uma correlação de 98,33%, com a dose mínima mortal determinada in vivo. Portanto, a linhagem MDCK permite titular a toxina épsilon de C. perfringens tipo D de forma específica e sensível, além de ser uma técnica prática, rápida e que dispensa o uso de animais.

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