Fecundação e clivagem após a ativação da proteína quinase C durante a maturação de oócitos bovinos

Ciência Rural

Rafael Gianella Mondadori¹  Paulo Bayard Dias Gonçalves²  Jairo Pereira Neves¹  Luis Fabiano Santos Da Costa¹  Marcelo Marcos Montagner¹  Silvia Ferreira Carámbula¹  Ederson Bisognin Bortolotto¹ 

[1] ,Universidade Federal de Santa Maria Centro de Ciências Rurais Departamento de Clínica de Grandes AnimaisSanta Maria RS

关键词: proteína quinase-C;    eletroforese;    maturação de oócitos;    bovino;    protein kinase-C;    SDS-PAGE;    oocyte maturation;    bovine;   

DOI  :  10.1590/S0103-84781999000100019

来源: SciELO

【 摘 要 】

A formação de pró-núcleos, clivagem e perfil protéico foram avaliados após a ativação da proteína quinase C (PQ-C) durante a maturação de complexos cumulus-oócito (CCOs) bovinos. Visando a determinar estes efeitos da PQ-C, 1936 CCOs foram distribuídos aleatoriamente em 4 tratamentos, sendo maturados na presença de PMA (100nM phorbol 12-myristate 13-acetate, ativador da PQ-C), de 4alfa-PDD (100nM de 4alfa-phorbol 12,13-didecanoetate, forbol éster que não ativa a PQ-C; controle forbol éster), de SVE (10% de soro de vaca em estro, controle positivo) e de um controle negativo constituído pelo meio de maturação básico para os demais tratamentos, com exceção do SVE, onde não foi adicionado o álcool polivinílico (PVA). Os CCOs foram mantidos na presença de PMA por 1, 4 e 7 horas, sendo após, transferidos para o meio básico de maturação até que se completassem 24 horas de cultivo. A estimulação da PQ-C, por esses períodos, não alterou a formação de pró-núcleos, porém, diminuiu a percentagem de clivagem dos zigotos. Os resultados do grupo 4alfa-PDD comprovam que as alterações ocorridas no grupo PMA são devido à ativação da PQ-C e não ação direta do forbol éster na célula. A análise da composição protéica demonstrou uma banda de proteína adicional no grupo SVE ao redor de 74 kilo Daltons (kDa). Os resultados desse estudo, quando associados aos dados preliminares de Western blot, indicam a importância da PQ-C na regulação da maturação, fecundação e clivagem de embriões bovinos.

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