Método fluorescente (diacetato de fluoresceína e brometo de etídeo) para o estudo da viabilidade de Cryptococcus neoformans em líquor

Revista do Instituto de Medicina Tropical de São Paulo

Benedito Corrêa²  Adhemar Purchio²  Claudete R. Paula²  Walderez Gambale²  Maria Aparecida Shikanai-yasuda¹ 

[1] ,Universidade de São Paulo Instituto de Ciências Biomédicas Departamento de MicrobiologiaSão Paulo SP ,Brasil

关键词: Cryptococcus neoformans;    Viabilidade;    Fluorescência;   

DOI  :  10.1590/S0036-46651990000100008

来源: SciELO

【 摘 要 】

Padronizou-se método de fluorescência (solução de diacetato de fluoresceína DF e brometo de etídio BE) para análise de viabilidade de células fúngicas, em 40 amostras de liquor, provenientes de casos comprovados de neurocriptococose. A utilização de solução aquosa de saponina a 0,3% eliminou fluorescências interferentes emitidas por hemácias e leucócitos. Após o processamento dos materiais biológicos, foram retiradas alíquotas de 0,1 ml das supensões obtidas e misturadas a volumes iguais da solução DF-BE preparada pouco antes do uso. O tempo de coloração ideal foi de 30 minutos, resultando perfeita diferenciação entre microrganismos viáveis (fluorescência verde) e não viáveis (fluorescência vermelha).

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